真菌糖原染色

❶ 皮肤真菌特殊色及酶组织化学然阴性是什么意思

两种病理制片方法。形成两种诊断方法。为了显示与确定组织或细胞中的正内常结构或病理过程中出容现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括：胶原纤维染色网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色脂肪染色糖原染色粘液染色等。是利用组织细胞内酶具有催化某种反应的特性来检测酶活性。在一定的条件下全酶进行催化作用，产生一种可见产物，沉淀在酶所在的部位，最终通过显微镜对酶的活性进行定位或定量研究。

❷ 病理 特殊染色具体包括哪些方法

特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。
包括：胶原纤维染色（Masson等）
网状纤维染色
弹力纤维染色
肌肉组织染色（磷钨酸苏木素）
脂肪染色（苏丹III）
糖原染色（PAS）
粘液染色（PAS）等。

❸ 红白血病糖原染色呈强阳性是否正确

你好！
E是对，幼稚淋巴细胞糖原染色呈阳性反应没错，但是红白血病时幼红细胞呈强阳性，详细可以去翻下人卫版《诊断学》。

❹ 细胞糖原染色在六孔板还是在载玻片上观察好

细胞爬片后观察是不是要在干净的六孔板1.爬片：24*24盖玻片，刚好用于6孔板。也可用更大的盖玻片，放在大的培养皿中爬片。2.盖玻片泡酸过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再置于无水酒清中浸泡6小时，再用三蒸水冲洗3遍（个人认为主要目的是将酸冲洗干净就可以了，如果不干净的话，细胞帖壁不好），放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒、烤干。3．盖玻片浸泡75%乙醇10分钟消毒，然后酒精灯上烤干，直接放入培养皿，开始种细胞。重点是玻片是干净的、无菌的。4.盖玻片在液体中经常有贴壁吸附力，用一般镊子很难一次性夹起，将注射器针头针尖向背面弄个小钩，这样将爬片轻轻勾起，用小镊子取出就可以。【细胞爬片】1.胰酶消化细胞后计数重悬细胞于完全培养基中。2.加细胞时，根据玻片的大小，先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基，目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起，然后放玻片，防止加细胞悬液时玻片漂起，造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。3.根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可4.按照实验设计，作用一定时间后取玻片。注意细胞不能太密，否则容易掉片。【细胞爬片的固定】1.细胞爬片取出后，PBS洗2遍。但比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗，因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落。2.常用的固定液1.）冷丙酮，可用于一般的免疫组化染色。将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮，加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。2.）多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL染色。主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存3.）95％乙醇，可用于免疫组化。优点：穿透性强、抗原性保存较好。缺点：但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，使蛋白变性的作用轻，固定后可再溶解；染色过程中，温育时间长，抗原可流失而减弱反应强度室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存4.）甲醛(福尔马林)应用最广优点：形态结构保存好，且穿透性强，缺点：甲醛放置过久可氧化为甲酸，使溶液pH降低，影响染色；分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存。【细胞爬片的组化染色】1.PBS清洗标本3次各2min。2.0.5%TritonX-100(DPBS配)孵育1次20min。（此步骤用于胞浆、胞核抗原）3.PBS清洗标本3次各2min。4.3%H2O2孵育15min。5.余下步骤同石蜡切片组化染色。

❺ 可以通过pas染色计算糖原含量吗

PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质. 具体现象例举：阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色； PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 颜色深浅与浓度相关.具体指标的含义去请教你们教授吧.

❻ 请问做特殊染色及酶组织化学染色诊断这个检查需要多少钱

两种病理制片方法。形成两种诊断方法。为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括：胶原纤维染色网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色脂肪染色糖原染色粘液染色等。是利用组织细胞内酶具有催化某种反应的特性来检测酶活性。在一定的条件下全酶进行催化作用，产生一种可见产物，沉淀在酶所在的部位，最终通过显微镜对酶的活性进行定位或定量研究。

❼ 糖原染色的临床意义

（1）急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应；缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应；急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等，幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。（2）帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应；霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。（3）帮助鉴别白血病细胞和腺癌骨髓转移的腺癌细胞，腺癌细胞呈阳性反应。

❽ 特殊染色的常用特染的应用

凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维，也可产生胶原纤维，纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维，是结缔组织中起支持作用的重要部分，具有一定的韧性和坚固性，能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维，胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种，间质中的胶原纤维主要由I、Ⅱ、Ⅲ型胶原组成，新鲜时呈白色，故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色，与周围间质区分不是很清楚。染色后，便可明显区别开来，易于观察病变时胶原纤维的变化。
应用：
（1）器官硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。
（2）瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。
（3）骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。 网状纤维是非常细而短的纤维，大量堆积时则形成致密的网状，故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少，它多分布在结缔组织与其它组织交界处，如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内，毛细血管周围以及造血器官，内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。
网状纤维的变化，反映了疾病的发生和发展的不同过程，对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂，都是病理检验的重要指标，尤其是在临床病理诊断中，可根据其存在和分布来鉴别癌与肉瘤。而在HE染色标本上，网状纤维不易显色。所以网状纤维的组织化学染色，在临床病理诊断上占着相当重要的位置。
应用：
（1）癌与肉瘤的鉴别：在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕，或似为团状或巢状的瘤组织，但团巢内仍有破碎的网状纤维，癌显示为明显巢或索状，巢内无网状纤维。
（2）骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别：骨基质内有网状纤维，而后者无。
（3）炎症细胞与癌细胞的鉴别：在支气管活检中有时挤压较重，一些深染的细胞挤压成团，难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别，炎症细胞不成巢，小细胞癌可有巢状或索状结构。
（4）坏死与死后自溶的鉴别：在胰腺是生前坏死还是死后自溶有时很难鉴别，染网状纤维，前者网状纤维支架破坏较严重，结构塌陷，而后者虽然死后自溶严重，但网状纤维支架结构常可保存。
（5）血管性肿瘤的鉴别：有时血管内皮细胞瘤与血管周围细胞瘤常规染色较难鉴别，网状纤维染色，可显示清楚的血管结构，看清肿瘤细胞与血管关系有利于鉴别。内皮细胞性肿瘤，肿瘤位于血管壁的网状支架内，而外周细胞则围绕着血管壁或与之呈放射状排列。
（6）肝硬化及慢性肝炎肝细胞碎片状坏死或纤维化的鉴别：
a．慢性活动性肝炎坏死灶有时较难辨认，染网状纤维显示局部有网状支架的破坏与崩解，结合HE切片较易判断小灶状坏死。
b．慢性活动性肝炎轻度纤维化，在网状纤维染色下较易判断。
c．慢性淤血性肝硬变有时较难判断，网状纤维较易观察中央静脉及小叶下静脉通道上的网状纤维增生。增生较明显，有反包围现象，形成假小叶结构，就可诊断淤血性肝硬变。
（7）萎缩性胃炎的诊断：在HE染色胃粘膜有无萎缩较难判断，网状纤维染色可较清楚显示胃粘膜正常结构破坏，间质纤维增生，有助于胃粘膜萎缩的诊断。
（8）有助于癌浸润的诊断，有些上皮性肿瘤是否早期突破基底膜形成浸润，HE染色难以确诊，而网状纤维染色可较清楚显示基底膜，较易确定基底膜有无早期浸润破坏现象。
（9）脑内原发瘤与转移瘤的鉴别：脑内绝大多数肿瘤网状纤维很少，只有血管周围有少量网状纤维，而转移癌及肉瘤都有明显的网状纤维，故有利于鉴别。
（10）非干酪性结核与结节病的鉴别：后者结节内及结节周围较早出现明显的网状纤维，观察此有利于二者鉴别。
（11）淋巴结病变的判断：
a．良性滤泡性反应性增生与滤泡性淋巴瘤鉴别，染网状纤维后显示：后者滤泡间网状纤维减少且有受挤压现象，前者网状纤维增加且较紊乱。
b．判断淋巴结的正常结构：有时HE切片较难判断正常结构是否完整，染网状纤维。皮髓质及窦的结构较清楚，若为炎症或肿瘤性破坏则较难辨认。 弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维，在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大，容易伸展，在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成，新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网，折光性强，含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色，量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别，量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。
应用：
（1）动静脉的辨认：在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时，弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉，有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强，故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。
（2）弹力纤维瘤的诊断：弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生，非真性肿瘤。
（3）心血管先天性弹力组织增生，这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。
（4）弹力纤维损伤性疾病：这组疾病有肺气肿、动脉粥样硬化、大动脉中层炎症等，弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。
（5）一些与弹力纤维变化有关的皮肤疾病的诊断与鉴别诊断：这组疾病有皮肤松弛症，萎缩性硬化性苔藓等，其诊断与鉴别诊断常依赖于弹力纤维染色，以观察弹力纤维变化。 脂肪和类脂统称为脂类，它是构成机体的正常成份，脂肪主要积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在于脂肪细胞胞浆内。因脂肪溶于酒精，故在HE染色中则被溶解掉，因此对某些疾病不能判断，所以必须进行脂肪染色。
应用：
（1）心、脑、肾等组织器官的脂肪栓塞，脂肪染色即可判定栓子是否为脂肪滴。
（2）心脏、肝脏等脂肪变性：脂肪染色可显示变性细胞内的脂滴。
（3）脂肪肉瘤与其它间叶组织的恶性肿瘤的鉴别：脂肪染色即可显示脂肪肉瘤瘤细胞内产生的脂滴。 糖类从组织化学技术角度来分，可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原，它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些肿瘤的病变中分布和量都有一定改变，故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。
（1）肝及心肌糖原沉着症的诊断：糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。
（2）糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。
（3）高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别：前者为阳性、后者为阴性，做此染色较易鉴别。
（4）骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断：此瘤 80%细胞内有较多糖原，糖原染色为阳性，所以糖原染色为阳性（大多数细胞）可以协助诊断。
（5）腺泡状软组织肉瘤与化感瘤：前者棒状小体糖原染色为阳性。
（6）间皮瘤或滑膜肉瘤与其它癌的鉴别：前者分泌含透明质酸的粘液，糖原染色为阳性，但透明质酸酶消化后即呈阴性反应，如有此染色特点，即可有助于诊断滑膜肉瘤或间皮瘤而不是癌。 粘液从组织源上分上皮细胞分泌性及结缔组织粘液性两种。粘液染色能有助于某些疾病的诊断。
应用：
（1）水肿与粘液变性：皮肤真皮水肿与粘液变性有时较难以从组织学上区别，染粘液有助于鉴别。
（2）硬皮病与硬肿病的鉴别：后者胶原纤维增生，纤维之间粘液阳性物质增多，有助于这两者之间的鉴别。
（3）粘液细胞癌的诊断与鉴别：胃活检时，印戒细胞与黄瘤细胞或泡沫细胞不易鉴别，染粘液即可确定是否为印戒细胞。
（4）胃癌分型：有人将胃癌分为肠型及胃型，这种分型与流行病、年龄及预后有一定关系，利用AB/PBS染色，胃癌细胞分泌中性粘液为胃型，分泌酸性粘液为肠型。 （含铁血黄素及黑色素）
含铁血黄素是由漏出于血管外的红细胞，被巨噬细胞吞噬后，分解血红蛋白产生的颗粒，HE染色为棕黄色，故称为含铁血黄素。因有时与福尔马林沉渣及黑色素等难相区别，故做含铁血黄素染色。
应用：
主要用于同其它色素鉴别，若为阳性，显示陈旧性出血。黑色素常见于皮肤色素细胞，恶性黑色素瘤常可产生黑色素。组织内大量存在时呈棕黑色，易于鉴别。但少量存在时便难与其它色素相鉴别，须作黑色素染色。
应用：
（1）黑色素瘤的诊断与鉴别诊断：肿瘤细胞内色素是否为黑色素，染黑色素有助于确定黑色素性质及肿瘤的定性诊断。
（2）血色病与黑便病：真皮内有色素沉着，黑色素阴性而含铁血黄素阳性者可能为前者。 神经原纤维呈细线状，存在于神经细胞体及树突中，它们形成一个稠密的网状，轴突中的原纤维也互相交织在一起，且伸延至轴突全长。在HE染色中呈粉红色，难与胶原纤维相区别，故须作神经纤维染色。
应用：
（1）有利于观察神经原纤维的损伤。
（2）神经系统肿瘤的诊断与鉴别诊断：如神经母细胞瘤与未分化癌的区别等。 真菌和霉菌：真菌引起的病变虽然多种多样，但都不具有特异性，且真菌在HE染色中均显蓝色，故须作真菌染色。
应用：
在化脓性炎、坏死性化脓性炎及肉芽组织性化脓性炎或化脓性炎伴有巨细胞反应疑为霉菌感染时，找到霉菌的菌丝、抱子及菌体即诊断为霉菌性炎。
细菌： 细菌在HE染色上不能分类，故须作细菌染色。
应用：
（1）一些疑为细菌感染性炎症，可用细菌染色进一步确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。
（2）风病与结核病：均由菌体表面含蜡质膜的抗酸杆菌所感染形成，故须经抗酸染色才能着色，从而与其它疾病相鉴别。