炎症抗體晶元
A. 為什麼抗體可以開發為葯物
抗體簡而言之就是生物機體產生的,對抗外來入侵抗原的蛋白質,天然的葯物啊。
具體參考下文:
1888年,德國的學者Behring和日本的學者北里用白喉外毒素免疫家兔,在免疫的血清中,發現中和細菌外毒素的物質,即抗毒素(antitoxins)和免疫血清。隨後其發現免疫血清能凝聚細菌,又成為凝集素(agglutinin)。之後其發現抗毒素和凝集素為同一物質,統一稱之為抗體(antibody,Ab)。
抗體作為疾病預防、診斷和治療的制劑已有上百年發展歷史。
1986年,一個治療性單抗(OrthocloneOKT3?ofOrthoBiotech,Raritan,NJ)在美國上市,上市以來由開始的微不足道市值增長到2003年的70億,並且20個針對22種疾病的單抗被批准上市。還有大約300個單抗現在正處於不同的臨床試驗的階段,其針對的是腫瘤、自身免疫、感染、移植排斥、過敏、心血管和炎症等多種疾病。
近幾年來,科技界陸續提出了免疫基因組學、腫瘤免疫組學、免疫組學、抗原組學、抗原表位組學等新概念。這些概念的提出,表示繼基因組、蛋白質組之後在科學上又一個新領域的產生;對生物技術來說,基因組研究的應用,通過抗原表位組學、抗體組學和抗原表位組學與抗體組學是建立在基因組學和蛋白組學基礎上的新興領域,正在成長為繼基因組和蛋白組後的科學熱點。應用相關的學科的最新成就,結合相關的技術,經過建立抗原表位庫和抗體庫,高通量篩選抗原靶標和抗原表位,可大大加速診斷、治療葯物靶標的篩選和研究與開發的進程。
抗體組葯物是在基因工程葯物、基因組葯物和傳統的抗體葯物的研究與開發的基礎上,應用基因組學、蛋白質組學、免疫組學、抗體組學、抗原表位組學和系統生物學的最新成果來研製抗體葯物。抗體組葯物與傳統的抗體葯物的研製相比,抗體組葯物研製是以高通量、整體化、信息化和系統化為特點,這樣一方面可以大大提高抗體葯物的研究與開發的速度,縮短葯物的研究與開發的周期,另一方面由於抗體組葯物的篩選應用了基因晶元、蛋白晶元和組織晶元等技術,既可獲得廣譜的抗體葯物,又可獲得個性化的抗體葯物。
基因組學和蛋白質組學的開展,使抗體組學的研究所需要的蛋白質群大量涌現,並且使抗體組學的研究所需要的蛋白質群被發現和鑒定,尤其是與疾病相關基因的鑒定和與疾病相關蛋白的研究,為研製疾病診斷和疾病治療性的抗體,提供了有價值的靶標。分子克隆技術水平的提高,高通量蛋白表達復性和純化技術的成熟,可快速大量制備免疫與篩選抗體所需要的抗原。小鼠單克隆抗體、大鼠單克隆抗體、兔單抗技術、全人抗體技術,以及大容量的抗體庫的構建和篩選技術,可高通量制備抗體。生物晶元技術(組織晶元,蛋白晶元和基因晶元)的產生與推廣,解決了抗體大規模篩選的問題。單抗葯物和基因工程葯物的大規模生產技術,以及抗體葯物臨床前和臨床試驗等系列的研究規范的實施,為抗體組葯物的生產、鑒定和安全性與有效性的評價鋪平了道路。
抗體葯物的分類、重要特點和研究與開發
抗體葯物的研究,其當前發展主要趨於包括:研究與應用新分子靶點,抗體的人源化,抗體葯物的高效化,抗體葯物分子的小型化,研究具有抗體功能的融合蛋白。
一、抗體葯物的分類
就分子的構成來看,抗體葯物可分3類:抗體或抗體片段,完整的抗體包括嵌合抗體、人源化抗體和人抗體,抗體片段包括Fab,Fab』,scFv等;抗體偶聯物或稱免疫偶聯物,其由抗體或抗體片段與「彈頭」物質連接而成,可用作「彈頭」的物質有放射性核素、化療葯物與毒素,這些「彈頭」物質與抗體連接,分別構成放射免疫偶聯物、化學免疫偶聯物與免疫毒素;融合蛋白,其由抗體片段和活性蛋白兩個部分構成。
二、抗體葯物的重要特點
抗體葯物所的重要特點:
(1)抗體葯物的特異性
針對特定的單一抗原表位,具有高度的特異性,這是抗體葯物發揮治療作用的重要基礎。對於抗腫瘤抗體葯物的研究表明,其特異性主要表現為特異性結合、選擇性殺傷靶細胞、體內靶向性分布和具有更加強的療效。
(2)抗體葯物的多樣性
抗體葯物的多樣性主要表現在靶抗原的多樣性、抗體結構的多樣性和作用機制的多樣性等方面。
(3)制備抗體葯物的定向性
抗體葯物可定向製造,即根據需要,制備具有不同的治療作用的抗體葯物。抗體葯物是針對特定的分子靶點定向製造的。可針對特定的靶分子,定向制備相應的抗體,也可根據需要選擇相應的「效應分子」,制備相應的免疫偶聯物或融合蛋白。
三、抗體葯物的研究與開發
抗體葯物的研究與開發的要緊之處主要包括:靶分子的挑選,抗體人源化和人抗體制備,抗體基因克隆和抗體庫構建,抗體高通量大規模的篩選技術,抗原表位的預測、模建和分析技術,抗原-抗體相互作用的立體構型模建,抗體體外親和力成熟,各種增加抗體效應功能的技術,動物模型反應與人體反應一致性,抗體高效表達載體構建和動物細胞規模化培養技術,等等。
抗體的能區分抗原分子的微小的差別和能阻斷炎症介質等特點,使其能在多種疾病的治療中進行應用。
B. 蛋白質晶元的優點
它具有以下優點:
⒈ 直接用粗生物樣品(血清、尿、體液)進行分析
⒉ 同時快速發現多個生物標記物
⒊ 小量樣品
⒋ 高通量的驗證能力
⒌ 發現低豐度蛋白質
⒍ 測定疏水蛋白質: 與「雙相電泳加飛行質譜」相比,除了有相似功能外,並可增加測定疏水蛋白質
⒎ 在同一系統中集發現和檢測為一體 特異性高 利用單克隆抗體晶元,可鑒定未知抗原/蛋白質,以減少測定蛋白質序列的工作量。
8.可以定量 利用單克隆抗體晶元,由於結合至晶元上的抗體是定量的,故可以測定抗原量,但一般飛行質譜不用於定量分析。
9.功能廣 I. 利用單克隆抗體晶元,可替代 Western Blot,Ⅱ. 利用單克隆抗體晶元,可互補流式細胞儀不足的功能,如將細胞溶解,可測定細胞內的抗原,而且靈敏度遠高於流式細胞儀)。
C. 結核病檢查報告 結核抗體晶元 有一項38Kd是陽性 其餘兩項陰性TB斑點試驗 陰性 胸片有若干小亮點 說明什麼
結核抗體是陽性說明曾經感染過結核,但是對於結核診斷沒有意義。您現在照的胸片結果和您現在有沒有症狀是比較重要的,胸片結果您描述的太簡單了。
D. 蛋白晶元的抗體晶元
蛋白組學研究是即基因組學研究後的生命科學發展的一個大方向之一。蛋白質的結構和功能最終直接影響著生命活動的變化,基因轉錄水平的研究只能在一定程度上反映基因表達產物的變化,而真正發揮功能的蛋白要經過轉錄後加工、翻譯調控以及翻譯後加工等許多步驟和調控才能形成,因而對蛋白質的直接研究才能真實的解釋各種生命現象。但是研究蛋白質的手段和方法還沒有很大的發展,所以尋找有效、快捷的蛋白分析技術成為了至關重要的一個環節。
蛋白晶元技術的出現給蛋白組學研究帶來新思路。蛋白組學研究中一個主要的內容就是要研究在不同生理狀態或病理狀態下蛋白水平的量變,微型化,集成化,高通量化的抗體晶元就是一個非常好的研究工具,它也是蛋白晶元中發展最快的晶元,而且在技術上已經日益成熟。這些抗體晶元有的已經在向臨床應用上發展,比如腫瘤標志物抗體晶元等,還有很多已經用在研究的各個領域里。
第一張商品化的抗體晶元是由美國BD Clontech公司推出的。這是一張用於研究的抗體晶元,晶元上排列了378種已知蛋白的單抗(Ab Microarray 380, 目錄號 K1847-1),這些單抗對應的蛋白都是細胞結構和功能上十分重要的蛋白,涉及信號傳導、腫瘤、細胞周期調控、細胞結構、細胞凋亡和神經生物學等廣泛的領域。通過這張晶元,我們在一次實驗中就能夠比較幾百種蛋白的表達變化。
Ab Microarray 380上抗體是經過精心挑選的,這些抗體不僅可以識別人源的蛋白,對小鼠和大鼠樣品同樣有效。另外,每個抗體的結合親和力都經過了實驗測定,從多種抗體來源的克隆中篩選出反應特異性好,交叉反應程度小,信號明顯的抗體,並且還要保證信號與抗原濃度有著良好的線性關系。優化的抗體探針才可以保證反應的特異和靈敏(可檢測20pg/ml的抗原濃度)。晶元的檢測是用熒光報告分子,常用的熒光掃描儀都能夠完成。
第一代的蛋白晶元和DNA晶元一樣是作為一種定性分析的工具,可用於分析樣品之間相關蛋白的相對表達豐度;還可以作為DNA晶元的補充,用於研究蛋白和基因表達之間的關系。
E. 星形膠質細胞會分泌哪些炎症因子
這個得查閱大量文獻才能得知。不然,就用高通量的手段去篩選。用蛋白表達檢測抗體晶元就可以達到要求,對人樣本來說,最多可以對樣本中的1000種細胞因子進行半定量檢測。如果只是針對炎症因子的話,一次可對樣本中的40個炎症因子進行半定量或者定量檢測。希望幫到你。
F. 反向蛋白晶元是怎麼回事
首先兩種晶元都是高通量的檢測。
反向蛋白質晶元,樣品中的待測蛋白質或多肽及其他生物分子通過化學鍵連接於固相載體上而被固定,固相載體表面經過封閉後,加入標記了熒光的探針,與固相生物分子進行雜交反應,洗去未結合的物質後,樣品點的熒光強度與樣品中待測成分的濃度成正比。技術可以把大量的待測樣品點陣於固相載體之上;採用了多種熒游標記,突破了一個點檢測一個樣品、一種成分的束縛,可以應用於檢測多種成分,幾種成分的比較,研究某種分子特性;節省待測樣品量;大量標本的檢測操作更簡單、准確,減少交叉污染。
簡單來說,反向蛋白質晶元就是拿你已知的一種或幾種帶標記的蛋白,去和樣品里的蛋白反應。
而抗體晶元是,用已知的高通量抗體,篩選樣品里可以反應的蛋白。
兩者,方法不同,相比而言,抗體晶元特異性更好些。
完全原創,希望能採納。
G. 蛋白晶元的差異對比
內源標准化處理可以得到一個內源標准化信噪比(INR),內源標准化處理是指對兩個樣品(A、B)中分別用兩種熒游標記分子(Cy3和Cy5)標記,並交叉與晶元雜交(見圖,A-Cy5和B-Cy3一組,A-Cy3和B-Cy5一組分別和晶元雜交),可以作為消除抗原—抗體結合效率差異的對照,也可以消除潛在的不同熒光分子的標記效率差異。假如Cy5標記效率高於Cy3,單純一個實驗的結果就會有偏差(Cy5標記的樣品信號偏高),用這種雙向交叉反應就可以消除這種偏差。兩晶元雜交結果分別得到兩組Ratio值,通過免費下載的工具就可以自動算出每個抗體抗原的INR值,這就代表在兩個樣品間某個蛋白的相對豐度。這種內源標准化處理可以大大減小樣品分析的偏差。
抗體晶元檢測的結果不是蛋白的絕對含量而是378個目的蛋白在兩個樣品之間的相對豐度。值得注意的是由於抗體抗原結合的差異、標記差異等原因,根據晶元結果信號的強弱判斷同一樣品中兩種不同蛋白的多少是不恰當的。
H. 抗體晶元的原理
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