真菌熒光檢測
❶ 植物病原真菌在用熒光素鈉染色後光學顯微鏡能觀察到嗎
能!可以用顯微鏡看到
❷ (陰囊)真菌熒光染色:陰性。要不要緊的。
你好,根據你所描述的情況來看,檢查結果提示陰囊無真菌感染。
❸ 真菌中基因表達是不是可以用熒光定量
異基因Differential Gene,是指一個基因在RNA水平處在不同環境壓力、時間、空間等方面下,表達有顯著性差異的基因。在不同因素下基因突變或者甲基化等結構發生改變導致差異的基因。
從PCR到新一代高通量測序,隨著實驗技術的不斷進步,差異基因開始被越來越多的研究者所關注,醫生不再停留在表型和蛋白層面,而是追溯他們的上游對核酸進行挖掘。
❹ 真菌鑒定的種類有幾種
現代真菌鑒定分型方法
北京大學第一醫院(100434) 王端禮
真菌 的 鑒 定不僅是臨床的需要,在植物病理學、生物退化、生物技術和環境的研究都很重要。許多真菌已經鑒定到種,但是分類學家仍在忙於新種的描述和其分類的研究。有些菌種由於經濟學的關系或是病理學的重要性,有深人的研究,其他則需要現代手段來進行研究。
一 、 形 態學
用表 型 特 征來進行分類鑒定,是過去和現在都普遍應用的方法。致病真菌的鑒定,需要光鏡,現在更加上熒光顯微鏡和細胞化學,還有各種染色法,如子囊泡子染色法。真菌在宿主體內鑒定比較困難,如菌絲只能看到有無分隔,有無色素。需要培養來鑒定菌種。某些病例用種特異性抗體探針非常有用,但此種技術尚未在醫真菌學領域內作為常規技術使用。合適的培養基培養鑒定菌種,是常用的方法。
醫學 真 菌 學家常見到的是半知菌,要看抱子形態和抱子發生,看產抱細胞,即分生抱子梗。有兩種型,一是芽生抱子發生,在產抱細胞上有一小點產生分生抱子,另一是葉狀抱子發生,整個細胞是產抱細胞,分成一至數個細胞。基於超微結構觀察,有許多詞語,但未能普遍應用。有的真菌沒有分生抱子,但仍有一些特徵,如菌核(sclerotia)、厚壁抱子和一些特殊的菌絲結構,如皮膚癬菌。在少數情況下,一些機會真菌產生有性結構,有許多特點用於菌種鑒定,如子囊菌、擔子菌和結合菌。
電鏡 , T EM是觀察菌的斷面,子囊菌酵母和擔子菌酵母的橫隔不同,SEM在實際應用有許多發現,如子囊菌的表面結構可以鑒定到種。
現 代 形 態學技術,如自動成像分析、電子顆粒體積、分數幾何學分析形態學的特點。
由於 表 型 各種詞語沒有一定的標准,有很大的主觀性,某些表型特徵也不穩定,受環境影響,有的不能在人工培養基上生長,有一些真菌尚未分類,分類概念有待近一步建立。
二 、分 子 生物學
表型 分 類 受限,生理生化技術在絲狀真菌鑒定方面,或是費時費事或是結果不準。分子生物學非常適用。有兩種技術,第一,PCR技術,可以分析少量真菌細胞,甚至單個真菌抱子。第二,選擇通用寡核昔酸對真菌種特異性引物,測定其核昔酸序列。分子生物學的研究目的由於生物多樣性有四個目的。I)系統發生研究。2)分類學的研究,在屬、種水平。3)鑒定應用,即決定明確的分類名稱。4)流行病學和群體的遺傳學研究。具體方法不再詳述。
三 、其 他 :
I,生 理 學 和生物化學
在純 培 養 上真菌生長比較快,可以使用生理、生化方法來鑒定菌種。如黑酵母的鑒定。不同的生長溫度也用於鑒定。有性和無性是一個輔助工具。在一定的培養基上,有對照,其生長速度也可用於鑒定,如青黴。AP[系統也用於絲狀真菌的鑒定。
2. 次 級 代謝產物
次級 代 謝 產物既不是為了生長需要,也不是介導基本代謝,常常發現它是一個與分了有關的混合物,有特殊的和極罕見的化學結構。常見的是固醇、菇、類鹼、香豆素等,某些是真菌毒素。將小量從培養皿切下來的標本,直接進行層析色譜法檢查,比傳統濃縮抽取提純法簡單易行。此法用於地衣的鑒定較好。很少用於真菌分類,由於對環境有一定影響,而且比較難,較少應用,但有人用於子囊菌的分類。
3. 泛 酉昆 系統
是一 種 初 級代謝產物,起重要作用。泛釀即輔酶Q,是呼吸系統電子傳播鏈的攜帶者。一些異戊二烯(isoprene)接觸醒核各有不同,對鑒定到屬或屬以下水平很有幫助。主要鑒定細菌和酵母,也用於黑酵母和絲狀真菌。
(Ya ma da Y ,e tal. In t.J.Genet 1989;5 6:309 Y ag uchiJ > e tal .M ycoscience 1996;3 7:55)0
4. 脂 肪 酸組成
此法 在 細 菌學方面是常規應用的。一是成分,二是相對濃度。極少用於真菌分類。使用熱解氣相色譜法、熱解塊狀光譜儀、氣相色譜儀、隔膜水相聚合物雙相系統等,主要應用這些方法。近來應用氣相色譜法合並多變數統計分析方法,成功地用於絲狀真菌,包括卵菌、擔子菌、結合菌、甚至只有菌絲的真菌。用於種間水平。應注意許多變化,如培養狀態和溫度是最主要的。
5. 細 胞 壁組成
子 囊 菌 和擔子菌含有幾丁質和葡萄糖,結合菌含有脫乙酞幾丁質(chitosen)和葡聚糖醛酸。不同的皮膚癬菌含有不同的糖分,醉母細胞壁或是缺乏或是含有少量其他多糖(如岩藻搪、乳糖、鼠李糖、木搪等)。
6. 蛋 白 質組成
用 電 泳 方法可以產生同工酶,可鑒定到屬或種。電泳、免疫學方法、蛋白質分析等可解決種間特性。同工酶分析是一個經濟和實用技術。等位基因酶(allozyme)通常用於系統發生的研究。
❺ 什麼是免疫熒光染色診斷
免疫熒光染色診斷:
用於檢測或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質結合,用於檢測或定位抗體。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。
原理:
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合後,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。
(5)真菌熒光檢測擴展閱讀:
免疫熒光檢查可分直接法、間接法、夾心法和補體法。
1、直接法的操作過程:
將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應的多餘熒光抗體,室溫下乾燥後封片、鏡檢。
2、間接法的操作過程:
如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進行反應,用水洗去未反應的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應,使之形成抗原—抗體—抗體復合物,再用水洗去未反應的標記抗體,乾燥、封片後鏡檢。
❻ 皮膚真菌報告單上,取材部位(免疫熒光染色診斷,無)是什麼意思,我要檢查是否白癜風
沒有真菌,做皮膚CT就可以了
❼ 真菌免疫熒光鏡檢結果
片春夏熱鬧過的土地,也許此時已很孤寂了吧!那麼,將一粒種子種下去和它作伴,不是更好嗎? 人們總是在給予的同時期待著,索要著,他們付出了就一定要求回報,他們太看重播種後收獲豐收的喜悅心情,而忽略了播種那一刻的心情.大地是需要一粒種子埋入它的。
❽ 請問真菌的分子生物學鑒定一般方法步驟
給你個論文,希望對你有幫助
現代真菌鑒定分型方法
北京大學第一醫院(100434) 王端禮
真菌 的 鑒 定不僅是臨床的需要,在植物病理學、生物退化、生物技術和環境的研究都很重要。許多真菌已經鑒定到種,但是分類學家仍在忙於新種的描述和其分類的研究。有些菌種由於經濟學的關系或是病理學的重要性,有深人的研究,其他則需要現代手段來進行研究。
一 、 形 態學
用表 型 特 征來進行分類鑒定,是過去和現在都普遍應用的方法。致病真菌的鑒定,需要光鏡,現在更加上熒光顯微鏡和細胞化學,還有各種染色法,如子囊泡子染色法。真菌在宿主體內鑒定比較困難,如菌絲只能看到有無分隔,有無色素。需要培養來鑒定菌種。某些病例用種特異性抗體探針非常有用,但此種技術尚未在醫真菌學領域內作為常規技術使用。合適的培養基培養鑒定菌種,是常用的方法。
醫學 真 菌 學家常見到的是半知菌,要看抱子形態和抱子發生,看產抱細胞,即分生抱子梗。有兩種型,一是芽生抱子發生,在產抱細胞上有一小點產生分生抱子,另一是葉狀抱子發生,整個細胞是產抱細胞,分成一至數個細胞。基於超微結構觀察,有許多詞語,但未能普遍應用。有的真菌沒有分生抱子,但仍有一些特徵,如菌核(sclerotia)、厚壁抱子和一些特殊的菌絲結構,如皮膚癬菌。在少數情況下,一些機會真菌產生有性結構,有許多特點用於菌種鑒定,如子囊菌、擔子菌和結合菌。
電鏡 , T EM是觀察菌的斷面,子囊菌酵母和擔子菌酵母的橫隔不同,SEM在實際應用有許多發現,如子囊菌的表面結構可以鑒定到種。
現 代 形 態學技術,如自動成像分析、電子顆粒體積、分數幾何學分析形態學的特點。
由於 表 型 各種詞語沒有一定的標准,有很大的主觀性,某些表型特徵也不穩定,受環境影響,有的不能在人工培養基上生長,有一些真菌尚未分類,分類概念有待近一步建立。
二 、分 子 生物學
表型 分 類 受限,生理生化技術在絲狀真菌鑒定方面,或是費時費事或是結果不準。分子生物學非常適用。有兩種技術,第一,PCR技術,可以分析少量真菌細胞,甚至單個真菌抱子。第二,選擇通用寡核昔酸對真菌種特異性引物,測定其核昔酸序列。分子生物學的研究目的由於生物多樣性有四個目的。I)系統發生研究。2)分類學的研究,在屬、種水平。3)鑒定應用,即決定明確的分類名稱。4)流行病學和群體的遺傳學研究。具體方法不再詳述。
三 、其 他 :
I,生 理 學 和生物化學
在純 培 養 上真菌生長比較快,可以使用生理、生化方法來鑒定菌種。如黑酵母的鑒定。不同的生長溫度也用於鑒定。有性和無性是一個輔助工具。在一定的培養基上,有對照,其生長速度也可用於鑒定,如青黴。AP[系統也用於絲狀真菌的鑒定。
2. 次 級 代謝產物
次級 代 謝 產物既不是為了生長需要,也不是介導基本代謝,常常發現它是一個與分了有關的混合物,有特殊的和極罕見的化學結構。常見的是固醇、菇、類鹼、香豆素等,某些是真菌毒素。將小量從培養皿切下來的標本,直接進行層析色譜法檢查,比傳統濃縮抽取提純法簡單易行。此法用於地衣的鑒定較好。很少用於真菌分類,由於對環境有一定影響,而且比較難,較少應用,但有人用於子囊菌的分類。
3. 泛 酉昆 系統
是一 種 初 級代謝產物,起重要作用。泛釀即輔酶Q,是呼吸系統電子傳播鏈的攜帶者。一些異戊二烯(isoprene)接觸醒核各有不同,對鑒定到屬或屬以下水平很有幫助。主要鑒定細菌和酵母,也用於黑酵母和絲狀真菌。
(Ya ma da Y ,e tal. In t.J.Genet 1989;5 6:309 Y ag uchiJ > e tal .M ycoscience 1996;3 7:55)0
4. 脂 肪 酸組成
此法 在 細 菌學方面是常規應用的。一是成分,二是相對濃度。極少用於真菌分類。使用熱解氣相色譜法、熱解塊狀光譜儀、氣相色譜儀、隔膜水相聚合物雙相系統等,主要應用這些方法。近來應用氣相色譜法合並多變數統計分析方法,成功地用於絲狀真菌,包括卵菌、擔子菌、結合菌、甚至只有菌絲的真菌。用於種間水平。應注意許多變化,如培養狀態和溫度是最主要的。
5. 細 胞 壁組成
子 囊 菌 和擔子菌含有幾丁質和葡萄糖,結合菌含有脫乙酞幾丁質(chitosen)和葡聚糖醛酸。不同的皮膚癬菌含有不同的糖分,醉母細胞壁或是缺乏或是含有少量其他多糖(如岩藻搪、乳糖、鼠李糖、木搪等)。
6. 蛋 白 質組成
用 電 泳 方法可以產生同工酶,可鑒定到屬或種。電泳、免疫學方法、蛋白質分析等可解決種間特性。同工酶分析是一個經濟和實用技術。等位基因酶(allozyme)通常用於系統發生的研究。
❾ 真菌熒光染色陽性哪些不能吃
這些真菌都不能吃
沒有什麼好處的
建議遠離這些真菌
忍一時口歡,換來長命百歲
希望能夠幫助到你
祝你生活愉快
❿ 如何利用熒光定量pcr檢測真菌狀態
第一次產物是不必要純化的.之所以要做巢式,就是因為第一次的產物量很少或者擴增的條件不優化.屬於一個優化實驗條件的步驟. 你可以做一個系列稀釋,比如你第二次飛反應體積是20微升,可以不稀釋,直接加1微升第一次反應的產物.其他的管子可以進行系列稀釋,根據結果再做調整. 最優條件有可能要反復幾次才能得到